CO2培养箱买家指南

CO2培养箱或加气培养箱是哺乳动物细胞培养实验室中的固定装置。虽然培养箱技术近几十年来没有太大变化,但决定正确的选择每年可以节省数百小时。

购买CO时的注意事项2培养箱包括:

  • 尺寸 - 您的实验需要多少空间?您需要在主孵化室内挤出多少设备,以及需要同时运行多少实验或培养?
  • 大气控制 - 你有多少,以及哪些气体?
  • 有可能在培养箱内部工作,门洞**小
  • 湿度及其翻转侧,蒸发
  • 加热
  • 减少污染风险
  • 去污协议
  • 开门后参数恢复
  • 温度和环境均匀性
  • 监控和数据捕获功能,尤其适用于受监管流程
  • 熟悉流程或操作员

培养箱使用CO 2来控制培养基中的pH并维持对细胞生长**佳的气氛。室内的典型条件是温度为37℃,相对湿度为95%,CO 2浓度为约5%。微生物培养箱,本文将不再详细讨论,具有更宽的温度范围(通常在5ºC和70ºC之间)。

由于在异G哺乳动物细胞培养物的兴趣,基于细胞的测定,和细胞治疗的浪涌,二氧化碳培养箱是一个增长的业务。

由于在异G哺乳动物细胞培养物的兴趣,基于细胞的测定,和细胞治疗的浪涌,二氧化碳培养箱是一个增长的业务。商业智能公司Research and Markets估计 ,未来四年对二氧化碳培养箱的需求将以每年近8%的速度增长。考虑到购买价格(从大约3,000美元到南方的20,000美元),平均使用寿命大约为10年,实验室资产的预计增长率很强劲。

“我们的客户越来越多地与脆弱的细胞类型,比如干细胞和原代细胞的工作,”莫莉爱,对CO全球**产品经理说:2的赛默飞世尔科技培养箱。Thermo Fisher**近推出了一种新产品Cell Locker System,它将培养箱的较大工作室隔离到可移动的保护区域,以提高培养效率和敏感培养的安全性。“细胞培养者现在能够在一个培养箱中隔离细胞类型或不同的项目,在不受干扰的环境中节省空间和气体,同时防止包括支原体在内的循环交叉污染。”

虽然有些实验室对培养箱的尺寸和特征有所顾忌,但更大更复杂并不总是更好。需求有时需要一个小型的,个人大小的培养箱,用户可以将其放入实验室的一个角落,忘记何时不使用它。对于这些用户来说,来自Labnet 的18磅重的可移动  迷你微生物学和血液学培养箱可能是一个不错的选择。Labnet还提供了更大的  211DS型号,带有内部电源插座,可堆叠搁架,大型观察面板和SmartChek™温度控制系统。

Binder还携带一系列紧凑型培养箱,其型号为C 170,可堆叠并使用180°C空气对设备进行灭菌。

重要的功能

“在我们建立**个培养箱之前,我们向微生物学家询问了他们**关心的问题,他们回答了'干燥'和'污染',”NuaireG际销售副总裁Buckner Richerson说。

Nuaire通过明智地应用HEPA过滤降低其培养箱(和生物安全柜)的污染风险,以保持培养箱内部符合ISO 5级清洁标准。主胶囊通过过滤和调节,轻柔地连续擦洗腔室气氛; 过滤器,泵和温度传感器都位于工作区域之外。

“这种设计每20分钟更换一次培养箱的气氛,同时**大限度地减少蒸发,并在关门后20分钟内将装置恢复到**佳运行状态,”Richerson补充道。根据Richerson的说法,Nuaire每年销售大约2,000个培养箱,几年来没有听说过污染事件。“当客户确实遇到污染时,我们是**个听到污染的人。”

作为一般污染缓解和蒸发**小化策略,Richerson建议缓慢换气,尽可能使气流垂直层流。水平流动的空气产生风洞效应,通过在样品周围产生气流涡流来促进污染和蒸发。

为了消除进入和未过滤的病原体,除了**基本的模型外,Nuaire在其所有直接热培养箱中都使用加热灭菌。去污在145ºC长时间发生,通常是一夜之间。Nuaire还提供铜衬里内饰作为选项,Richerson说一些用户更喜欢作为避免污染的额外步骤,但通常不是必需的。

NU-5710直热式培养箱Richerson还指出,一些热灭菌协议非常复杂,用户**终会停止使用它们。循环可能需要人为干预,移除内部结构(例如搁架)或用虚设单元替换温度传感器。“培养箱内的所有东西都能在145摄氏度的温度下存活,所以你永远不需要拿出任何东西。培养箱基本上变成了高压灭菌器。“

所有培养箱都可以进行手动清洁,但在Nuaire培养箱中,所有内部角都是圆形的,这样可以减少微生物可以抓住的区域,并便于使用化学药剂进行清洁。

NU-5710直热式培养箱。图片由NuAire提供。

 

加热和消毒

水套是培养箱加热的一种老策略。这些装置仍然可用,特别是在二手市场中,但是水套已经让位于空气护套,直接加热或两种技术的组合。

培养箱制造商在这三种加热方案中引入了自己的改进。例如,来自Eppendorf 的Galaxy®170S直热式CO2培养箱就是一个带有专有扭转的直接加热装置的例子 - 一种六面,无风扇,无过滤器的加热系统,根据该公司的说法,它可以防止变宽温度和二氧化碳的波动,这是压力细胞。

“客户喜欢水套式培养箱的温度安全性,但由于需要水夹套模型进行持续维护以及泄漏风险,因此已经开始直接加热模型,”Caron营销副总裁Alan Campbell说道。产品与服务。后在2017年引入的卡隆CO其Wally®线2培养箱,其中,根据坎贝尔,提供的水夹套和直接热设计的优点,“与自己无关的缺点。”卡隆使用包围所述相变材料文化空间而不是水。

Wally还采用纤薄的外形设计,允许将设备放置在较小的实验室,走廊,过道和其他密封区域,其中培养箱门打开可能会导致问题。“与传统的立方体培养箱相比,Wally可以节省高达19英寸的深度,”Campbell解释道。

空间利用延伸到培养箱本身。大多数实验室工作人员只使用培养箱的前部区域,因为背部很难到达。“他们支付的容量高达一半是浪费的空间。Wally纤细的腔室深度使得所有腔室容积都可以使用,同时为**常用的细胞培养瓶/板尺寸提供足够的空间。

Caron还对灭菌周期进行了升级,在标准培养箱中,灭菌周期非常耗时(基于热量)或劳动密集型(湿H 2 O 2)。Wally使用(另一项正在申请**的)干H 2 O 2循环,Campbell说在短短两小时内提供可验证的12-log灭菌,“没有耗时的腔室配置和湿H 2 O 2过程所需的清理“。

过氧化物灭菌装置通常作为第三方升级添加到培养箱中。松下生产的H 2 O 2灭菌套件通过经销商销售,例如VWR,该公司声称其  比热灭菌快8倍。它还销售全系列的培养箱,尺寸从几立方英尺到30立方英尺不等,具有标准和可选功能,如加热灭菌,红外二氧化碳和氧气传感器,温和气流,微处理器控制,图形监控和数据收集。

鉴于“典型”培养箱的多样化应用和操作参数范围,存在的消毒替代品并不令人惊讶。Analytic Jena提供一种培养箱型号UVP,它采用紫外线消毒代替热,化学清洗或过氧化物。

无风扇,无微生物

据里克·埃里森在美GBMT业务发展经理,影响CO**的问题2培养箱交叉污染,振动,恢复慢和门开口后读数,以及对于微生物污染创造了机会的大门和墙壁上凝结。

CO2 Cell 190舒适培养箱,200C灭菌BMT在其CO2培养箱中采用无风扇设计,显着降低了前两个问题的影响。“零振动实际上消除了细胞边缘效应的任何可能性,”埃里森说。“无风扇设计还可以减少蒸发,从而**大限度地减少样品中的水分流失。”

无风扇培养箱还增加了可用空间,因为不需要管道或内置HEPA组件。“维护和更换这些组件被消除,因为是更换风扇HEPA过滤器元件的成本。”湍流气流是潜在的污染的CO的主要来源2培养箱。“我们的培养箱专门设计用于提供**低的污染风险,”Ellison补充道。

CO2 Cell 190舒适培养箱,200C灭菌。图片由BMT提供。

污染从实验室内的任何来源进入培养箱,包括个人的头发和衣服,打开的窗户,甚**实验室的通风系统。一旦进入培养箱,微生物就会闩到风扇上,在那里它们遍布整个装置。

“粉丝仍然是培养箱中清洁的**困难的组成部分,”埃里森说。“因此,带风扇的培养箱需要在风扇前添加昂贵的HEPA过滤器以保护风扇。这增加了风险和成本的另一个方面。“

这并不是说所有空中运动都会伤害文化。例如,Amerex在其INCUMAX™培养箱中使用强制空气循环,  以提供开门后温度均匀性和快速恢复。应该可以在达到平衡之前获得强劲的气流,然后在维护模式下保持更不稳定的气流,但市场上没有培养箱似乎具有此功能。

但是当空气传播的生物进入培养箱时,冷凝成为它们的生长介质。BMT通过将孵育室包裹在直热电缆中,使所有表面迅速达到指定温度,从而**大限度地降低了这种风险。三回路直接加热设计允许编程四个关键加热区:腔室底部,腔室门,腔室壁和腔室顶部。BMT对它们进行编程,以略微不同的速率加热,以产生柔和,温和的对流。

“**重要的是,对于冷凝控制,会产生一个冷点(相对于其他加热区域),以便将水分吸到室底和水盘中,”Ellison补充道。“玻璃门由外部隔热门加热,以阻止冷凝形成,从而消除了细菌生长的环境,使得水套室不能。